Методические рекомендации по обнаружению, идентификации и определению содержания зеаралинона в пищевых продуктах № 4.05.014.97* (утверждены главным государственным санитарным врачом Республики Казахстан от 1 июля 1997 года)

«Утверждаю»

Главный государственный

санитарный врач

Республики Казахстан

Е.Е. Дурумбетов

1 июля 1997 г.

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ПО ОБНАРУЖЕНИЮ, ИДЕНТИФИКАЦИИ И ОПРЕДЕЛЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ ЗЕАРАЛИНОНА В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ
4.05.014.97*

* Методические рекомендации подготовлены Казахской Республиканской санитарно-эпидемиологической станцией на основе МР № 2964-84, разработанных Институтом питания РАМН.

Предназначены для использования лабораториями санитарно-эпидемиологической службы, осуществляющих контроль за продуктами питания и пищевым сырьем.

Зеаралинон-лактон б-(10 окси-6-кето-транс-1-ундецил)-b-резорциловой кислоты, или F-2-токсин-микотоксин, продуцируемый различными видами микроскопических грибов рода Fusarium. В естественных условиях зеараленон обнаружен в пшенице, ячмене, овсе и других зерновых продуктах. Особенно часто и в высоких концентрациях зеараленон загрязняет кукурузу, пораженную гнилью початков, вызываемой грибами Fusarium.

Зеаралинон обладает выраженным эстрогенным действием на большинство видов сельскохозяйственных животных, а также на приматов, вызывая нарушения функций воспроизводства.

Потребление кормов с высоким содержанием зеараленона может приводить к накоплению в тканях сельскохозяйственных животных и к экскретированию с молоком как зеараленона, так и его метаболитов, эстрогенное действие которых выше, чем у исходного микотоксина. В этой связи содержание зеаралинона в зерновых на уровне, превышающем 1000 мкг/кг, следует рассматривать как потенциально опасное для здоровья населения.

Зеараленон (С₁₈Н₂₂О₅) - белое кристаллическое вещество с молекулярной массой 318 и максимумом поглощения в УФ-спектре при 236, 274 и 316 нм. Зеараленон проявляет сине-зеленую флуоресценцию низкой интенсивности при возбуждении длинноволновым (360 нм) УФ-светом, которая усиливается при возбуждении коротковолновым (250 нм) УФ-светом.

Интенсивность флуоресценции под действием длинноволнового УФ-света усиливается после обработки зеараленона раствором хлористого алюминия в этиловом спирте. Наиболее высокочувствительным способом обнаружения зеараленона на хроматографических пластинках является проведение реакции азосочетания со стабилизированными диазониевыми солями.

В основе предлагаемого метода определения зеараленона лежит визуальная оценка интенсивности окраски пятен зеараленона при двумерной тонкослойной хроматографии (ТСХ) после обработки пластинки раствором бис-диазотированного орто-дианизидина (прочной синей В-соли). Зеараленон проявляется в виде красно-бордовых пятен, предел обнаружения на пластинке для чистого стандарта -10 нг, для зеараленона, добавленного к экстракту зерна, - 20 нг в пятне.

Предел обнаружения зеараленона в образце составляет 40 мкг/кг, относительное стандартное отклонение - 0,4-0,6. Продолжительность анализа - 3-3,5 часа.

Метод включает следующие этапы:

- экстракцию зеараленона из образца смесью ацетонитрил-водный раствор хлористого калия (9:1);