Микроскопическое исследование мокроты

Микроскопическое исследование мокроты

Микроскопическое исследование нативных и фиксированных окрашенных препаратов мокроты позволяет подробно изучить ее клеточный состав, в известной степени отражающий характер патологического процесса в легких и бронхах, его активность, выявить различные волокнистые и кристаллические образования, также имеющие важное диагностическое значение, и, наконец, ориентировочно оценить состояние микробной флоры дыхательных путей (бактериоскопия).

Приготовление нативных и окрашенных препаратов

Чтобы добиться более равномерного распределения в материале клеточных структур, перед исследованием целесообразно гомогенизировать мокроту. С этой целью в мокроту добавляют 1-2,5% водный раствор димексида в соотношении 1:1 и встряхивают смесь в течение 10-15 минут.

Для приготовления нативных препаратов небольшое количество подготовленного материала помещают на предметное стекло и сверху накладывают покровное стекло так, чтобы клеточный материал был распределен равномерным тонким слоем.

Важную дополнительную информацию о клеточном составе мокроты и ее микробной флоре получают при цитологическом исследовании фиксированных окрашенных препаратов мокроты. С этой целью после центрифугирования 1,0 мл мокроты на предметное стекло наносят 0,5 мл осадка. Мазок высушивают, фиксируют метанолом и окрашивают по Романовскому-Гимзе. Для выявления и подсчета количества эозинофилов в мокроте применяют окраску азур-эозином или эозин-метиленовым синим, при которой зерна (гранулы) эозинофилов окрашиваются в красный цвет. Для обнаружения так называемых сидерофагов (см. ниже) используют обработку мокроты смесью растворов соляной кислоты и железисто-синеродистого калия (реакция образования берлинской лазури).

Для выявления эластических волокон к мокроте добавляют равный объем едкой щелочи (КОН) и нагревают до гомогенного состояния, что ведет к разрушению слизи и клеточных элементов мокроты (эластические волокна при этом не разрушаются). После охлаждения и добавления 2-3 капель 2% раствора эозина, окрашивающего эластические волокна, гомогенат центрифугируют и из осадка приготавливают мазок.

Наконец, для изучения микробной флоры (бактериоскопии) мокроту окрашивают по Граму, а для выявления микобактерий туберкулеза — по Цилю- Нильсену.

Окраска по Граму. На фиксированный препарат мокроты накладывают фильтровальную бумагу и наливают карболовый раствор генцианового фиолетового. Окрашивают 1,5-2 мин. После этого фильтровальную бумагу удаляют и предметное стекло опускают в раствор Люголя на 2 мин. Затем обесцвечивают препарат в спирте, промывают в воде и в течение 10-15 с докрашивают 10% раствором карболового фуксина. Препарат мокроты снова промывают водой и высушивают.