Сравнительный анализ информативности радиоиммунологического исследования и лазерной корреляционной спектроскопии при миастении и миастенических синдромах (М.Ю. Карганов, О.И. Ковалева, А.Г. Санадзе, Д.В. Сиднев, В.В. Пивоваров, С.Б. Ланда)

Сравнительный анализ информативности радиоиммунологического исследования и лазерной корреляционной спектроскопии при миастении и миастенических синдромах

М.Ю. Карганов, О.И. Ковалева, А.Г. Санадзе, Д.В. Сиднев, В.В. Пивоваров, С.Б. Ланда

Современные методы лабораторной диагностики позволяют определять содержание огромного количества веществ в биологических жидкостях организма и на основе полученных данных диагностировать соответствующие заболевания. Однако определение концентраций индивидуальных веществ не позволяет интерпретировать полученные результаты в плане интегральной оценки гомеостаза.

Использованный нами метод лазерной корреляционной спектроскопии (ЛКС), позволяющий определять размеры субклеточных частиц и соотношения между ними, оказался весьма эффективным для достижения этой цели [3]. В основе метода ЛКС лежит регистрация спектральных характеристик монохроматического когерентного излучения в результате светорассеяния при прохождении через дисперсную систему. Для полидисперсных систем методами спектрального анализа спектра рассеянного света рассчитываются функции распределения частиц по их размерам. Полученная при этом корреляционная функция обрабатывается методом регуляризации, который не требует знания априорной информации и использует удобное гистограммное представление данных.

Целью настоящей работы было сопоставить информативность традиционного подхода (радиоиммунологическое определение концентрации антител к ацетилхолиновому рецептору) с оценкой сдвигов метаболизма, выявляемых с помощью ЛКС при миастении и миастенических синдромах.

Материал и методы исследования

Обследовано 35 пациентов: 29 больных с аутоиммунной миастенией, 3 - с конгенитальными миастеническими синдромами и 3 - с миастеническим синдромом Ламберта-Итона. Диагноз миастении или миастенического синдрома основывался на результатах клинического и электромиографического исследований, а также данных фармакологического теста с введением прозерина или калимина-форте. Тяжесть клинических проявлений миастении оценивалась по шестибалльной шкале, где 0 - отсутствие симптомов болезни, а 5 - их максимальная выраженность.

Процедуру радиоиммунологического определения концентрации антител к ацетилхолиновому рецептору (АХР) проводили с помощью набора фирмы «DLD Diagnostika GmbH» (Германия). Образцы сыворотки хранили при -20^оС. Перед анализом их размораживали, отбирали аликвоты по 5 мкл и помещали в пробирки. К пробам добавляли по 100 мкл 125I-рецептора ацетилхолина (удельная активность - 342 Сi/ммоль), 50 мкл антител к IgG человека, перемешивали и инкубировали 30 мин при комнатной температуре. Добавляли по 1 мл промывочного буфера, центрифугировали при 3000 g 20 мин, надосадочную жидкость удаляли декантацией. Полученный осадок ресуспендировали и повторяли процедуру промывки.

Определяли радиоактивность проб («RackBeta», LKB, Швеция) и вычисляли концентрацию антител по следующей формуле:

С = (cpmi - cpmn) x D x F,

где С - концентрация антител, нмоль/л