Лабораторная диагностика гельминтозов (Резидент КазНМУ им С.Д. Асфендиярова Енцов Д.В.)

Лабораторная диагностика гельминтозов

Резидент КазНМУ им С.Д. Асфендиярова Енцов Д.В.

Гельминтозы (глистные заболевания) вызывают паразитические черви и гельминты (глисты): острицы, цепни, аскариды, эхинококки и др. Их яйца или личинки попадают в рот с водой, пылью, грязью через руки, овощи, ягоды. фрукты. некоторые личинки проникают через кожу при хождении босиком или лежании на земле. Паразитирование различных видов гельминтов в организме человека обуславливает разнообразие клинических проявлений. Больные обращаются не только к терапевтам, но и к врачам различных специальностей по доминирующим проявлениям болезни. Поражение внутренних органов зависит не только от постоянного места обитания паразитов, например, кишечник, мочеполовая система, но и от занесения током крови мигрирующих личинок в легкие, головной мозг, перикард, лимфатические узлы, костный мозг. Установлено, что массивность заражения и иммунный статус больного определяют тяжесть состояния от субклинических форм до тяжелых, типа септических (суперинвазий).

Показаниями для обследования являются многие симптомы: воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта, утомляемость, раздражительность, тревожный сон, скрип во сне зубами (бруксизм), прианальный зуд, вульвовагинит. инфекции мочевыводящих путей, отставание в росте и весе, повышенный уровень эозинофилов в крови и многие другие состояния. Особенно необходимо выделить состояние, при котором первоначально не ясна причина аллергического синдрома. В этом случае наряду с общеклиническими и инструментальными исследованиями, позволяющими установить органную локализацию патологического процесса, необходимо проводить повторные, возможно многократные микроскопические исследования кала, мокроты, дуоденального содержимого и желчи в целях обнаружения либо яиц, либо личинок, либо самих гельминтов.

Часто встречающийся дисбиоз (дисбактериоз) кишечника определяется не только составом микроорганизмов, но и наличием простейших и гельминтов. Уменьшается число кишечных палочек, снижается устойчивость полезных микроорганизмов к возбудителям острых кишечных инфекций. Так как микрофлора кишечника является одним из факторов, поддерживающих повышенную активность ферментов кишечника, развивающиеся вследствие гельминтоза нарушения процессов всасывания и приваривания пищевых веществ приводят к потере массы тела, задерживают развитие и рост ребенка.

1.Несмотря на то, что человека могут заражать более 250 видов гельминтов (из них около 100 видов зарегистрировано в России), выявление глистных инвазий - явление нечастое. В общеклинической практике применяется в основном копроовоскопический метод диагностики гельминтозов. Метод приготовления нативного мазка из свежих испражнений или соскобов из анальной области с последующим микроскопированием конечно дешевый, но опасный в плане заражения персонала лабораторий и недостаточно информативный. Яйца глист выделяются с определенной периодичностью, могут быть неоплодотворенными, деформированными, а также вступившими в различные стадии эмбриогенеза. Это усложняет трактовку увиденного в препарате. Чтобы обнаружить их яйца, надо уловить тот момент, когда они начнут размножаться, а это далеко не всегда удается. Например, острицы, ведущий ночной образ жизни, часто бывают просто неуловимы. Ведь соскоб в клинике делается днем.

2.Более объективным можно считать гистологическое исследование кала на наличие в нем гельминтов, но эта методика малодоступна из-за дороговизны и сложности этого метода исследования кала (в практической медицине его используют для анализа биопсий и верификаций опухолей). Тем не менее, этот метод имеет ряд преимуществ, а именно позволяет полностью исследовать кусочек кала на разных уровнях, делает возможным применять различные окраски срезов материала. Метод достаточно информативен, позволяет выявить глистную инвазию по фрагментам гельминтов, яйцам глист и кутикулам личинок. Исследование безопасно для сотрудников лабораторий. В отличие от нативных мазков гистологические препараты можно длительно хранить и объективно оценивать эффективность противоглистной терапии.

3.В настоящее время все большее распространение получают серологические методы диагностики (иммуноферментный анализ - ИФА и др.), основанный на обнаружении у пациентов антител к антигенам гельминтов. Они обеспечивают высокую достоверность результатов анализа, доступны для большинства лабораторий, просты в исполнении и достаточно дешевы. В крови инвазированных лиц происходит увеличение титров специфических антител, сначала IgM-, а затем IgG-классов. Если это не реинвазия, то в организме больного с аллергическими проявлениями еще отсутствуют гельминты в репродуктивной стадии развития, и паразитологическая диагностика гельминтоза невозможна. Период созревания гельминта может быть достаточно продолжительным и зависит от многих факторов. На этой стадии диагностика заболевания возможна только по выявлению антител к антигенам гельминта. Использование высокочувствительного метода иммуноферментного анализа с этой целью оказалось весьма эффективным.

При хронизации большинства гельминтозов аллергические проявлении, уровень эозинофилов периферической крови, а также титры специфических антител значительно снижаются. Исключение составляют случаи инвазий несвойственными человеку гельминтами (например, токсокарами), суперинвазии и реинвазии, особенно при тканевых гельминтозах. Выявление антител к антигенам этих паразитов в сочетании с клиническими симптомами и эпиданамнезом является единственным способом постановки правильного диагноза.

Сопутствующие обследования также могут подтвердить гельминтозы. Глисты нередко проявляются в анализе на дисбактериоз и общем анализе крови (низкий гемоглобин, повышенная СОЭ, эозинофилия).

Следует обратить внимание на тот факт, что в хронической фазе гельминтозов характер клинических проявлений, тяжесть течения и исходы зависят от интенсивности инвазии и места обитания паразита, иногда его размеров. В хронической фазе преобладают симптомы и синдромы, отражающие нарушение функции органа или системы, в которых паразитирует возбудитель, или которые находятся под воздействием его патогенных факторов. Вследствие этого для топической диагностики применяют ультразвуковое исследование органов, компьютерную томографию, эндоскопию с эндобиопсией.

Рассмотрим диагностику токсокароза, описторхоза и трихинеллеза.

Токсокароз

Токсокароз - инвазия, вызываемая аскаридами собак. Токсокароз является заболеванием, о котором, несмотря на широкое распространение и важную роль в патологии, особенно у детей, практические врачи знают весьма немного. Симптоматика его очень разнообразна, поэтому с ним могут встретиться врачи самых разных специальностей - педиатры, терапевты, окулисты, гематологи, гастроэнтерологи, невропатологии, дерматологи и другие.

Одним из ведущих и наиболее постоянных проявлений висцеральной формы токосокароза является стойкая длительная эозинофилия, вплоть до развития эозинофильно-лейкемоидных реакций крови. Обычно относительный уровень эозинофилов превышает 30%, а в отдельных случаях может достигать 90%. Общее количество лейкоцитов также повышается до 15-20 х 10*9/л, а в некоторых случаях - до 80 х 10*9/л. Эозинофилия может сохраняться в течение нескольких месяцев и лет.

Прижизненный паразитологический диагноз токсокароза практически невозможен, поэтому ведущее место в диагностике занимают иммунологические тесты. Одним из наиболее эффективных исследований является иммуноферментное выявление антител к антигенам гельминта. На основании титра антител можно судить о тяжести заболевания. титр специфических антител 1:800 и выше с большой степенью вероятности свидетельствует о заболевании, а титры 1:200, 1:400 - о носительстве токсокар при висцеральном токсокарозе и патологическом процессе при токсокарозе глаза.

За лицами с низкими титрами противотоксокарных антител при наличии показаний следует установить диспансерное наблюдение и при явлениях клинических признаков болезни провести специфическую терапию.

Описторхоз

Для достоверного исключения опситорхоза при обследовании больных может оказаться недостаточно даже многократной копроовоскопии или исследования образцов желчи на наличие яиц описторхисов. Отсутствие яиц в пробах описторхозных больных может быть обусловлено (1) невозможностью обнаружения яиц у людей на ранней стадии заболевания, когда еще отсутствуют половозрелые мариты описторхисов, способные к яйцепродукци; (2) цикличностью яйцепродукции гельминтов; (3) неравномерным распределением яиц по содержимому толстой кишки; (4) невысокой вероятностью обнаружения яиц паразитов при низкой интенсивности инвазии. Поэтому существенным дополнением к паразитологическим методам диагностики опистархоза являются иммунологические тесты. Чувствительность ИФА, как показали исследования, достаточна для детекции антител к антигенам описторхисов как в доимагинальный, так и в имагинальный период инвазии. При первичном контакте с антигенами описторхисов иммунная система инвазированного человека начинает вырабатывать к антигенам паразита иммуноглобулины класса М. Их синтез достигает максимального значения через 1,5 - 2 недели, а через 6 - 8 недель начинает быстро снижаться, поскольку иммунная система человека переключается на синтез иммуноглобулинов класса G. Продукция специфических IgG достигает максимума к 2-3 месяцам от начала заражения и держится на таком уровне довольно долго. Однако при длительных сроках заболевания у больных нередко наблюдается значительное снижение уровня специфических антител, ниже порогового, который может быть определен современными методами.

Трихинеллез

Трихинеллез можно заподозрить на основании клинических симптомов (лихорадка, отек лица, миалгии, эозинофилия) и эпидемиологического анамнеза (указание на употребление в пищу свинины, мяса медведя, кабана и других диких животных). Для подтверждения диагноза при необходимости делают биопсию дельтовидной и икроножной мышцы. Широко используют ИФА по определению антител к трихинеллезным антигенам, который является наиболее чувствительным и специфичным методом. Специфические антитела появляются через 14 - 15 дней после заражения и достигают максимума на 4 - 12 неделе. Диагностический титр ИФА - 1:200. У лиц с подозрением на трихинеллез при слабоположительном или отрицательном результате рекомендуется повторить исследование ИФА через 10 - 14 дней. При заражении «диким штаммом» в некоторых случаях ИФА будет положительный только на 4 - 7 неделе. У переболевших трихинеллезом людей антитела сохраняются долго, более двух лет.