Руководство по лабораторной диагностике эпидемического сыпного тифа и болезни брилла (утверждено приказом Министерства здравоохранения Кыргызской Республики от 19 ноября 2004 года № 529)

Утверждено

приказом Министерства здравоохранения

Кыргызской Республики

от 19 ноября 2004 года № 529

Руководство
по лабораторной диагностике эпидемического сыпного тифа и болезни брилла
 
1. Введение

Серологические методы являются обязательным разделом лабораторной диагностики сыпнотифозной инфекции и изучения их эпидемиологии. Серологические реакции выполняются с применением видоспецифических антигенов и вследствие своей высокой специфичности имеют решающее значение для подтверждения риккетсиозной природы заболевания.

Предлагаемые методические рекомендации составлены с целью унификации методик исследований с учетом опыта лабораторий России и в соответствии с рекомендациями Всемирной Организации Здравоохранения.

2. Серологические методы диагностики эпидемического сыпного тифа и болезни Брилла

2.1. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)

Позволяет выявить антитела к возбудителю сыпного тифа, начиная с 5-7-го дня болезни, что придает ей особую ценность. В острый период болезни титры в РНГА колеблются от 1600 до 51200. В основе реакции непрямой гемагглютинации лежит специфическая агглютинация эритроцитов, сенсибилизированных риккетсиозным антигеном или иммуноглобулинами, в присутствии соответствующих групповых антител или антигенов.

2.1.1. РНГА с антигенным риккетсиозным эритроцитарным диагностикумом.

РНГА с антигенным риккетсиальным эритроцитарным диагностикумом предназначена для обнаружения и титрования специфических антител риккетсиальной природы в исследуемых сыворотках людей.

Антигенный эритроцитарный диагностикум представляет собой лиофильно высушенную взвесь 3% формалинизированных эритроцитов барана, сенсибилизированных гидролизованным антигеном (гаптеном) риккетсий.

К антигенному эритроцитарному диагностикуму прилагается лиофильно высушенная 6% взвесь несенсибилизированных (контрольных) формалинизированных эритроцитов барана, предназначенных для контроля исследуемых сывороток и истощения их от неспецифических гемагглютининов. Истощение сывороток может проводиться и неформалинизированными эритроцитами.

Для разведения ингредиентов реакции используют формалинизированный физиологический раствор (ФФР). Последний представляет собой 0,85% раствор хлорида натрия (рН=7.0), к которому добавлен формалин из расчета 0,3мл на 100мл раствора хлорида натрия.

Ингредиенты реакции:

1) Исследуемая сыворотка или исследуемый антиген.

2)Антигенный риккетсиальный или иммуноглобулиновый риккетсиальный эритроцитарный диагностикум или антигены для РНГА.

3) Формалинизированные или негативные эритроциты барана.

4)Физиологический раствор, 1% раствор нормальной кроличьей сыворотки.

5) Формалин.