Руководство по лабораторной диагностике клещевого вирусного энцефалита (утверждено приказом Министерства здравоохранения Кыргызской Республики от 22 марта 2013 года № 130)

Приложение 3

Утверждено

приказом Министерства

здравоохранения

Кыргызской Республики

от 22 марта 2013 года № 130

Руководство
по лабораторной диагностике клещевого вирусного энцефалита

Диагностика клещевого энцефалита (КВЭ) основывается на клинико-эпидемиологических данных и результатах лабораторных исследований.

Лабораторная диагностика клещевого энцефалита осуществляется путем выделения вируса от больного, определения вирусного антигена и специфических антител с помощью иммунологических реакций, выявление РНК вируса методом полимеразной цепной реакции.

Правила взятия материала для исследования

Существенное значение для лабораторной диагностики КЭ имеют условия забора, хранения, транспортировки и сроки доставки материала в лабораторию.

Для вирусологической диагностики на КВЭ (выделение вируса) материалом исследования являются кровь, плазма, сыворотка крови, спинномозговая жидкость больных, мозг погибших людей.

При подозрении на клещевой энцефалит кровь и спинномозговую жидкость следует забирать в первые дни заболевания (6-7 дней) до начала лечения специфическим иммуноглобулином.

Основным источником выделения вируса от больных служит кровь, взятая в ранние сроки заболевания в стадии вирусемии (до 6-7 дня). В более поздние сроки вирус из крови удается выделить редко. Кровь берут из вены в количестве не менее 5 мл в стерильные пробирки или флаконы, которые плотно закрываются и доставляются в лабораторию.

Если кровь для выделения вируса будет доставлена в лабораторию в течение 2-4 часов, то достаточно поместить емкости в пластиковых пакетах в термос с тающим льдом. Если для доставки материала требуется несколько дней, то его транспортируют в емкостях с жидким азотом или сухим льдом. Кровь замораживать не следует, т.к. она гемолизируется, становясь непригодной для серологических исследований и токсичной для животных и тканевых культур. До замораживания нужно отделить сыворотку крови от сгустка.

В редких случаях вирус может быть выделен из спинномозговой жидкости, которая берется квалифицированным специалистом посредством спинномозговой пункции. Спинномозговую жидкость в количестве 2-3 мл, помещают в стерильную пробирку и немедленно доставляют в лабораторию с соблюдением «холодовой цепи».

При летальном исходе заболевания проводят исследование мозговой ткани, взятой из различных отделов головного мозга (продолговатого мозга, ствола), шейного и грудного отделов спинного мозга. Вскрытие проводиться не позднее 6-12 часов после смерти. Секционный материал забирают стерильно, иссекая кусочки объемом 2-3 см3, помещают в стерильные пластиковые или стеклянные баночки, пробирки, флаконы с завинчивающими, резиновыми или притертыми пробками. Взятый материал срочно транспортируют в лабораторию, соблюдая условия «холодовой цепи».

Материалом для серологического исследования на КВЭ является сыворотка крови.