Утвержден приказом Председателя Комитета контроля медицинской и фармацевтической деятельности МЗ РК от 28 июля 2010 года № 412
Инструкция Название изделия медицинского назначения Набор реагентов «РеалБест ДНК Mycoplasma genitalium» для выявления ДНК Mycoplasma genitalium методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени
Состав и описание изделия 1. ПРИНЦИП МЕТОДА Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фрагмента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комлементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных последовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой. В основе используемого метода регистрации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию специфичного для данного участка ДНК возбудителя инфекции гибридизационного ДНК-зонда, который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5′ конце флуоресцентный краситель, а на 3′ конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5′-3′ нуклеазной активности Taq-полимеразы, зонд расщепляется с 5′ конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце. Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК M. genitalium из клинических проб совместно с предварительно внесённым внутренним контрольным образцом (ВКО). 2. СОСТАВ НАБОРА Положительный контрольный образец универсальный (ПКО) − на основе плазмидной ДНК со встройкой фрагментов ДНК возбудителей инфекций - 1 фл., 1 мл; Готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 96-луночный планшет (состоящий из 12 стрипов). Стрипированные крышки - 12×8 шт. или оптическая плёнка - 3 листа. Внимание! ПКО должен пройти процедуру выделения ДНК с помощью наборов «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест ДНК-экстракция 2» или «РеалБест экстракция 100», согласно инструкциям к наборам 3. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ амплификатор с флуоресцентной детек-цией в режиме реального времени: «iQ iCycler», «iQ5 iCycler», «CFX96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (фирма «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналог; ПЦР-бокс или отдельный стол, освещаемый УФ-лампой (например, «Циклотемп», фирмы СП «РТС», Россия); холодильник бытовой, поддерживающий температуру (2-8)°С (например , «Минск», «Атлант»); Документ показан в сокращенном демонстрационном режиме
Чтобы продолжить, выберите ниже один из вариантов оплаты
Доступ к документам и консультации
от ведущих специалистов
Вы можете купить этот документ
Как купить документ? 400 тг
|