Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК Ureaplasma urealyticum и ДНК Ureaplasma parvum методом полимеразной цепной реакции. Инструкция по медицинскому применению изделия медицинского назначения (утверждена приказом Председателя Комитета контроля медицинской и фармацевтической деятельности МЗ и СР РК от 1 июня 2017 года № 008557)

Утверждена

приказом Председателя

Комитета контроля медицинской и

фармацевтической деятельности МЗ и СР РК

от 1 июня 2017 года № 008557

Инструкция

по медицинскому применению изделия медицинского назначения

Название изделия медицинского назначения

Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК Ureaplasmaurealyticum и ДНК Ureaplasmaparvumметодом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК Ureaplasmaurealyticum / Ureaplasmaparvum) (комплект 1)

Состав и описание изделия

1. Характеристика набора

Принцип метода.

Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фрагмента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных последовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой.

В основе регистрации процесса амплификации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию гибридизационного ДНК-зонда, специфичного для выбранного участка ДНК возбудителя инфекции, который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5′-конце флуоресцентный краситель, а на 3′-конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5′−3′-нуклеазной активности Taq-полимеразы, зонд расщепляется с 5′-конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.

Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК Ureaplasma urealyticum и ДНК Ureaplasma parvum из клинических проб совместно с предварительно внесённым неконкурентным внутренним контрольным образцом (ВКО).

2. Состав набора

Комплектность:

1. Положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - на основе плазмидной ДНК со встройкой фрагментов ДНК Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum - 1 фл., 1 мл.;

2. Готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 96 пробирок (12 стрипов по 8 пробирок).

3. Стрипированные крышки для пробирок (12 стрипов по 8 штук) или оптическая плёнка - 1,5 листа.

3. Аналитические и диагностические характеристики

3.1. Чувствительность - определение 100 копий ДНК Ureaplasma urealyticum и ДНК Ureaplasma parvum в стандартных образцах предприятия - 100%.

3.2. Специфичность определения ДНК Ureaplasma urealyticum и ДНК Ureaplasma parvum(по стандартной панели предприятия отрицательных ДНК-экстрактов) - 100%.

4. Оборудование и материалы