Набор реагентов для определения ДНК вируса Эпштейна-Барр методом полимеразной цепной реакции. Инструкция по медицинскому применению изделия медицинского назначения (утверждена приказом Председателя Комитета контроля медицинской и фармацевтической деятельности МЗ и СР РК от 1 июня 2017 года № 008556)

Утверждена

приказом Председателя

Комитета контроля медицинской и

фармацевтической деятельности МЗ и СР РК

от 1 июня 2017 года № 008556

Инструкция

по медицинскому применению изделия медицинского назначения

Название изделия медицинского назначения

Набор реагентов для определения ДНК вируса Эпштейна-Барр методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК ВЭБ) (комплект 1)

Состав и описание изделия

1. Характеристика набора

Принцип метода.

Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фрагмента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных последовательностей с этих праймеров Taq ДНК-полимеразой.

В основе используемого метода регистрации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом цикле ПЦР.

Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию специфичного для данного участка ДНК ВЭБ гибридизационного ДНК-зонда, который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5’-конце флуоресцентный краситель, а на 3’-конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5’−3’-нуклеазной активности Taq ДНК-полимеразы, зонд расщепляется с 5’-конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством бактериальной ДНК в образце.

Достоверность анализа контролируется по наличию положительного результата в образце ПКО, который подвергается процедуре выделения ДНК вместе с анализируемыми биопробами.

Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК ВЭБ из клинических проб совместно с предварительно внесённым внутренним контрольным образцом (ВКО).

2. Состав набора

Комплектность:

       1.             положительный контрольный образец универсальный (ПКО) − на основе плазмидной ДНК со встройкой фрагментов ДНК возбудителей инфекций - 1 фл., 1 мл;

       2.             готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 96 стрипированных пробирок (12 стрипов по 8 пробирок);

       3.             стрипированные крышки для пробирок (12 стрипов по 8 штук) или оптическая плёнка - 1,5 листа.