Набор реагентов для определения ДНК Ureaplasma species. Инструкция по медицинскому применению изделия медицинского назначения (утверждена приказом Председателя Комитета контроля качества и безопасности товаров и услуг МЗ РК от 20 декабря 2019 года № 025436)

Утверждена

приказом Председателя

Комитета контроля качества

и безопасности товаров и услуг МЗ РК

от 20 декабря 2019 года № 025436

Инструкция

по медицинскому применению изделия медицинского назначения

1. Наименование медицинского изделия для диагностики in vitro:

Набор реагентов для определения ДНК Ureaplasma species методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени(РеалБест ДНК Ureaplasma species) (комплект 1)

2. Состав и описание медицинского изделия:

2.1. Состав:

Ÿ  положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - на основе плазмидной ДНК со встройкой фрагментов ДНК Ureaplasma species и гена HMBS - 1 пробирка, 1 мл;

Ÿ  готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 96 пробирок.

Набор дополнительно комплектуется:

Ÿ   оптической плёнкой - 1,5 листа.

2.2. Принцип метода:

Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фрагмента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных последовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой.

В основе используемого метода регистрации лежит измерение флуоресценции в каждом цикле ПЦР.

Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию специфичного для данного участка ДНК возбудителя инфекции гибридизационного ДНК-зонда, который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5^’-конце флуоресцентный краситель, а на 3’-конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5^’−3^’-экзонуклеазной активности Taq-полимеразы, зонд расщепляется с 5^’-конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.

В анализируемых образцах дополнительно оценивается содержание ДНК гена HMBS человека с целью валидации качества забора материала.

2.3. Аналитические и диагностические характеристики:

Чувствительность - определение 100 копий ДНК Ureaplasma species и 250 копий ДНК гена HMBS в стандартных образцах предприятия - 100%.

Специфичность определения ДНК Ureaplasma species и ДНК гена HMBS (по стандартной панели предприятия отрицательных ДНК-экстрактов) - 100%.

2.4. Оборудование и материалы:

‒        амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени: «iQ iCycler», «iQ5 iCycler», «CFX96» (фирма «Bio-Rad», США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналог;