Набор реагентов для выявления ДНК Helicobacter pylori. Инструкция по медицинскому применению изделия медицинского назначения (утверждена приказом Председателя Комитета контроля качества и безопасности товаров и услуг МЗ РК от 13 января 2020 года № 025940)

Утверждена

приказом Председателя

Комитета контроля качества

и безопасности товаров и услуг МЗ РК

от 13 января 2020 года № 025940

Инструкция

по медицинскому применению изделия медицинского назначения

1. Наименование медицинского изделия для диагностики in vitro:

Набор реагентов для выявления ДНК Helicobacter pylori методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК Helicobacterpylori) (комплект 1)

2. Состав и описание медицинского изделия:

2.1. Состав:

·         положительный контрольный образец (ПКО) − на основе плазмидной ДНК со встройкой фрагментов ДНК Helicobacter pylori - 1 пробирка, 1 мл;

·         внутренний контрольный образец (ВКО), лиофилизированный - 2 фл.;

·         готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 48 пробирок.

Набор дополнительно комплектуется:

Ÿ   оптической плёнкой - 1 лист;

Ÿ   завинчивающимися пластиковыми крышками для флаконов с ВКО - 2 шт.

2.2. Принцип метода:

Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фрагмента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных последовательностей с этих праймеров Taq ДНК-полимеразой.

В основе используемого метода регистрации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию специфичных для данных участков ДНК Helicobacter pylori гибридизационных ДНК-зондов, которые в ходе реакции связываются с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5’-конце флуоресцентный краситель, а на 3’-конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5’-3’-нуклеазной активности Taq ДНК-полимеразы, зонд расщепляется с 5’-конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции.

При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.

Достоверность анализа контролируется по наличию положительного результата в образце ПКО, который подвергается процедуре выделения ДНК вместе с анализируемыми биопробами.

Учёт эффективности выделения ДНК Helicobacter pylori из образцов обеспечивается выделением ДНК из клинических проб совместно с предварительно внесённым внутренним контрольным образцом (ВКО).

2.3. Аналитические и диагностические характеристики

2.3.1.Чувствительность определение 100 копий ДНК Helicobacter pylori в пяти образцах, приготовленных из Стандартного образца предприятия (СОП) ДНК Helicobacter pylori - 100 %.