Набор реагентов для определения щелочной фосфатазы. Инструкция по медицинскому применению изделия медицинского назначения (утверждена приказом председателя Комитета фармации МЗ РК от 28 апреля 2018 года № 014690)

Утверждена

приказом председателя

Комитета фармации МЗ РК

от 28 апреля 2018 года № 014690

Инструкция

по медицинскому применению изделия медицинского назначения

Название изделия медицинского назначения

Набор реагентов для определения щелочной фосфатазы.

Состав и описание изделия

После смешивания R1 и R2 как указано в инструкции, реагент содержит:

п-нитрофенил фосфат 17 мМ

Ионы магния 4 мМ

Буфер (рН 10,2±0,2)

Активатор и связывающий компонент

Уровень щелочной фосфатазы (ALP), встречающейся почти в каждом органе, определяемый в сыворотке крови, представляет интерес при диагностике расстройства гепатобилиарной системы и заболеваний костной ткани. В сыворотку взрослого человека большая часть щелочной фосфатазы поступает из печени и желчных протоков. Нормальный уровень щелочной фосфатазы зависит от возраста и повышен в период активного костного роста. Умеренное повышение щелочной фосфатазы (не учитывая содержания фермента в печени и костной ткани) может указывать на болезнь Ходжкина, застойную сердечную недостаточность и абдоминальные бактериальные инфекции. Также повышение уровня ALP в сыворотке крови наблюдается в третьем триместре беременности.

Концентрация щелочной фосфатазы определяется по измерению скорости гидролиза различных фосфатных эфиров. р-Нитрофенилфосфат, один из таких эфиров, использовался как субстрат Fujita в1939 гBowers и McComb в дальнейшем модифицировали процедуру кинетического анализа. В 1974, Комитет по Энзимологии Скандинавского Общества Клинической Химии и Клинической Физиологии приняли модификацию данного метода, как рекомендовано в процедуре анализа.Настоящий метод - это модификация референсных методов вышеупомянутого комитета и Американской Ассоциации Клинической Химии.

Принцип метода

Ферментативный метод определения концентрации щелочной фосфатазы основан на следующей реакции:

щелочной фосфатазы

п-НФФ + H₂O ------------------------→ п-нитрофенол + H₃PO₄

п-НФФ - бесцветное соединение, а п-нитрофенол при 405 нм имеет высокую абсорбцию. Скорость увеличения поглощения при 405 нм пропорциональна ферментативной активности.

Наименование и (или) товарный знак организации-производителя

HighTechnologyInc., (США).

Область применения

Клиническая и лабораторная диагностика.

Способ применения

Реагент для измерения концентрации щелочной фосфатазы используется как для автоматической процедуры измерения на биохимическом оборудовании, так и для ручной процедуры измерения на подходящем спектрофотометре.

Автоматический метод определения

Процедура проведения - см. соответсвующую инструкцию.

Ручной метод определения.

1.       Приготовить рабочий реагент в соответствии с инструкцией.

2.       Внести по 1,0 мл реагента в соответствующие пробирки и нагреть до 37ºС.

3.       Настроить спектрофотометр на «0» по воде при 405 нм.

4.       В пробирку с реагентом внести 0,025 мл (25 мкл) образца. Хорошо перемешать.