Набор реагентов для определения однонуклеотидного полиморфизма -13910C/T гена MCM6 методом полимеразной цепной реакции. Инструкция по медицинскому применению изделия медицинского назначения (утверждена приказом Председателя Комитета контроля качества и безопасности товаров и услуг МЗ РК от 13 января 2020 года № 025935)

Утверждена

приказом Председателя

Комитета контроля качества

и безопасности товаров и услуг МЗ РК

от 13 января 2020 года № 025935

Инструкция

по медицинскому применению изделия медицинского назначения

1. Наименование медицинского изделия для диагностики in vitro:

Набор реагентов для определения однонуклеотидного полиморфизма -13910C/T гена MCM6 методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с детекцией кривых плавления (РеалБест-Генетика MСМ6)

2. Состав и описание медицинского изделия:

2.1. Состав набора:

В состав набора входят следующие компоненты:

- контрольный образец «Гомозигота C/C» (КО1) - 1 пробирка, 1 мл;

- контрольный образец «Гомозигота T/T» (КО2) - 1 пробирка, 1 мл;

- готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 48 пробирок;

- элюирующий раствор «Генетика» - 2 флакона по 12 мл.

Принадлежности:

- оптическая плёнка - 1 лист.

2.2 Принцип метода:

Принцип метода основан на амплификации выбранного участка ДНК человека и последующей детекции кривых плавления гибридных комплексов продуктов ПЦР и специфичных зондов. Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах: температурная денатурация ДНК-матрицы, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями ДНК-матрицы, синтез комплементарной цепи с этих праймеров Taq-полимеразой.

После реакции амплификации понижение температуры приводит к гибридизации специфичного ДНК-зонда с продуктом амплификации и к снижению уровня флуоресцентного сигнала в пробирке. В процессе температурного плавления образовавшихся дуплексов происходит высвобождение ДНК-зонда, несущего флуоресцентный краситель. В случае неполной комплементарности ДНК-зонда и выбранного участка ДНК, температура плавления дуплекса будет ниже, чем в случае полной комплементарности. Таким образом, для двух аллельных вариантов температуры плавления дуплексов зонда и продуктов амплификации отличаются, благодаря этому идентифицируется генотип по каждому из определяемых полиморфизмов.

Генотип «С/С» повышает риск непереносимости лактозы и развития остеопороза.

Генотип «С/Т» ассоциирован с вариабельным уровнем лактазной активности и повышает риск развития вторичной лактазной недостаточности.

Генотип «Т/Т» повышает вероятность хорошей переносимости лактозы.

2.3. Аналитические и диагностические характеристики

2.3.1.  Специфичность определения однонуклеотидного полиморфизма -13910С/Т гена MCM6 человека определяется по стандартному образцу предприятия, СОП (рег. № 05-2-566), как процентное содержание правильно определённых генотипов в образцах № 1 и № 2 СОП ДНК МСМ6 и составляет 100%.

2.3.2.  Контрольный образец КО1 должен определяться как генотип «Гомозигота C/C» по полиморфизму -13910С/Т.

2.3.3.  Контрольный образец КО2 должен определяться как генотип «Гомозигота Т/Т» по полиморфизму -13910С/Т.