Цитохимическое исследование липидов
Липиды локализуются в цитоплазме клеток главным образом в мембранах органелл и обнаруживаются преимущественно внейтрофильных гранулоцитах. Играют важную роль в проницаемости мембран. Цитохимическое исследование липидов основано на применении красящих веществ, растворяющихся в жирах (судан III, судан IV, черный судан и др.). Для выявления нейтрального жира пользуются суданом III, окрашивающим жир в оранжевый цвет. Липоиды выявляются лучше суданом черным (черное окрашивание). Окраска суданом III (метод Гольдмана) Растворение жиров и окраска суданом III в оранжевый цвет. Посуда и оборудование химические стаканы или кюветы мерные цилиндры пипетки воронки горелка Реактивы Формалиновый спирт (1 часть формалина и 4 части 96% спирта) 70% этиловый спирт (к 100 мл 96% спирта прибавить 39,18 мл дистиллированной воды) Альфа-нафтол Раствор судана (к 100 мл 70 % спирта добавляют 20 мл дистиллированной воды, 1,2 г альфа-нафтола и в избытке судан III. Раствор кипятят в течение 10 мин и фильтруют) Краситель Романовского-Гимзы Ход окраски Мазки крови фиксируют в формалиновом спирте в течение 1-3 мин. Красят в растворе судана III в течение 10 мин. Помещают в 70% этиловый спирт на 1 мин. Докрашивают красителем Романовского-Гимзы или гематоксилином в течение 5 - 10 мин. Промывают дистиллированной водой. Липиды выявляются в виде оранжевых зерен. Окраска суданом черным. Метод Шихана, Стори. Реактивы Раствор судана черного В. Растворяют 0,3 г судана в 100 мл абсолютного спирта. Оставить при комнатной температуре на 1 - 2 дня до полного растворения. Буферный раствор: а) 16 г кристаллически чистой карболовой кислоты растворяют в 30 мл абсолютного спирта; б) 0,3 г двузамещенного фосфата натрия растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Растворы «а» и «б» смешать. Перед употреблением готовят забуференный раствор судана, смешивая 60 мл раствора судана и 40 мл буферного раствора. 0,2% раствор однозамещенного фосфата калия. Краситель Романовского-Гимзы. Документ показан в сокращенном демонстрационном режиме
Чтобы продолжить, выберите ниже один из вариантов оплаты
Доступ к документам и консультации
от ведущих специалистов
Вы можете купить этот документ
Как купить документ? 400 тг
|