Набор реагентов билирубина прямого. (инструкция по медицинскому применению изделия медицинского назначения для потребителя (аннотация-вкладыш), утверждена приказом Председателя ККМФД МЗ РК от 20 февраля 2012 года № 133)

Утвержден

приказом Председателя

Комитета контроля медицинской и

фармацевтической деятельности МЗ РК

от 20 февраля 2012 года № 133

Инструкция

по применению изделия медицинского назначения для потребителя

(аннотация-вкладыш)

Название изделия медицинского назначения:

Набор реагентов билирубина прямого.

Состав и описание изделия:

Материалы, входящие в состав набора

Реагент билирубина прямого

Реагент нитрита натрия прямого.

Калибратор билирубина

Материалы необходимые, но не поставляемые

Автоматические пипетки

Таймер

Пробирки

Биохимический анализатор, для измерения оптической плотности при длине волны 555 нм (540-560 нм) с подходящей для анализа кюветой.

Область применения:

Клиническая и лабораторная диагностика.

Способ применения:

История метода

В 1884 году Erlich и соавт. для определения концентрации билирубина предложили реакцию между билирубином и диазотизированной сульфаниламидной кислотой (ρ-диазобензенсульфаниламидная кислота), которая сопровождается образованием азо- окраски. Окраска соединения, получающегося в результате реакции, розовая в кислой среде и голубая в щелочной. Измерение интенсивности голубой окраски используется чаще, так как обладает большей чувствительностью. В сыворотке крови с помощью диазо- реакции можно определять два типа билирубина. Прямой билирубин, то есть конъюгированная, водорастворимая форма, может вступать в реакцию с диазо- соединением без наличия т.н. «ускоряющих» или растворяющих агентов. Непрямой билирубин, то есть, свободная, неконъюгированная форма, связан с альбумином сыворотки крови. Поэтому для протекания реакции с диазо- соединением требуется наличие «ускоряющих» агентов. Конъюгированный и неконьюгированный билирубин составляют общий билирубин. Определение конъюгированного и неконьюгированного билирубина полезно для выявления вероятной причины гипербилирубинемии.

Принцип метода

Сульфаниловая кислота реагирует с нитритом натрия с образованием диазотизированной сульфаниловой кислоты (диазо). Связывание билирубина прямого с диазо приводит к образованию азобилирубина. Интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству билирубина прямого в образце.

Реагенты

Реагент билирубина прямого: сульфаниловая кислота, 32 ммоль, в растворенной соляной кислоте.

Нитрит натрия реагент: нитрит натрия 60 ммоль.

Подготовка реагентов

Рабочий реагент билирубина прямого: добавить 5 мкл нитритного реагента на 1,0 мл реагента билирубина прямого. Перемешать. Например: 50 мкл нитрита / 10 мл реагента билирубина прямого, 100 мкл нитрита / 20 мл реагента билирубина прямого.

Автоматический метод определения

См. соответствующие инструкции к биохимическому анализатору.

Ручной метод определения

Тест Бланк

Рабочий реагент 1,0 -----

Реагент билирубина прямого ----- 1,0

Образцы 0,10 0,10

Пометить соответствующие пробирки: «Бланк», «Стандарт», «Контроль», «Пациент». К каждой тестируемой пробирке необходимо по пробирке с бланком.

Внести по 1,0 мл реагента билирубина прямого во все пробирки с бланком.