СТ РК ИСО 13903-2011
(ISO 13903:2005, IDT)
Содержание
8. Использование эталонных материалов Приложение А (информационное). Результаты межлабораторных испытаний Приложение В (информационное). Примеры хроматограмм
Настоящий стандарт устанавливает определение свободных (синтетических и натуральных) и общих (связанных пептидами и свободных) аминокислот в кормах для животных с использованием анализатора аминокислот или оборудования высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ). Стандарт применим к следующим аминокислотам: - сумма цистина и цистеина; - метионин; - лизин; - треонин; - аланин; - аргинин; - аспартовая кислота; - глютаминовая кислота; - глицин; - гистидин; - изолейцин; - лейцин; - фенилаланин; - пролин; - серин; - тирозин; - валин. Метод не проводит отличий между солями аминокислот, также как и между D и L-формами аминокислот. Метод недействителен для определения триптофана или гидроксо-аналогов аминокислот. Пределы квантификации обусловлены хроматографическим оборудованием, однако, как правило, очень низкие: 0,3 г/кг общего лизина; 0,25 г/кг общего метионина; 0,35 г/кг общего цистина плюс цистеина; 0,2 г/кг общего треонина; 0,035 г/кг свободного лизина; 0,035 г/кг свободного метионина и 0,03 г/кг свободного треонина, могут быть проанализированы. ПРИМЕЧАНИЕ. Более низкий предел квантификации или обнаружения потенциально может быть достижим, однако это должно подтверждаться пользователями.
Свободные аминокислоты экстрагируются разбавленной соляной кислотой. Совместно экстрагированные азотистые макромолекулы осаждаются сульфосалициловой кислотой и удаляются фильтрацией. Уровень рН профильтрованного раствора доводится до 2,20. Аминокислоты отделяются ионообменной хроматографией и определяются реакцией с нингидрином фотометрическим обнаружением при 570 нм. Выбор процедуры зависит от исследуемых аминокислот. Цистин/цистеин и метионин перед гидролизом должны быть окислены до цистеиновой кислоты и сульфона метионина, соответственно. Тирозин должен определяться в гидролизатах неокисленных образцов. Все другие аминокислоты, перечисленные в Разделе 1, могут определяться как в окисленном, так и неокисленном образце. Окисление выполняется при 0°С смесью надмуравьиной кислоты/фенола. Избыток окисляющего реактива разрушается дисульфитом натрия. Окисленный либо неокисленный образец гидролизуется соляной кислотой (с = 6 моль/л) в течение 23 часов. Гидролизат доводят до уровня рН 2,20. Аминокислоты отделяются ионообменной хроматографией и определяются реакцией с нингидрином с помощью фотометрического обнаружения при 570 нм (440 нм для пролина).
Документ показан в сокращенном демонстрационном режиме
Чтобы продолжить, выберите ниже один из вариантов оплаты
Доступ к документам и консультации
от ведущих специалистов
Вы можете купить этот документ
Как купить документ? 8000 тг
|